凹凸棒石/聚乳酸-羥基乙酸靜電紡復(fù)合納米纖維的制備及其生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究
來(lái)源：中國(guó)凹凸棒土網(wǎng) 10-26 22:36
靜電紡納米纖維具有尺寸可控、比表面積大、孔隙率高和獨(dú)特的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)，可以很好地模擬天然細(xì)胞外基質(zhì)，因此在組織工程支架和藥物載體領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。聚乳酸-羥基乙酸（PLGA）具有良好的生物相容性和生物可降解性，在靜電紡組織工程支架和藥物載體領(lǐng)域已有廣泛的應(yīng)用。凹凸棒石（ATT）是一種含硅鎂離子的天然礦物質(zhì)，分子式為(Mg, Al)2Si4O10(OH)·4(H2O)，是一種很好的無(wú)機(jī)藥物載體材料，同時(shí)具有高表面活性和較強(qiáng)的機(jī)械性能。
本文第二章我們制備了PLGA/ATT納米纖維并研究了其作為組織工程支架誘導(dǎo)hMSC成骨分化的能力。通過(guò)不同的技術(shù)表征制備得到的PLGA/ATT納米纖維，分別使用掃描電子顯微鏡（SEM）、拉伸試驗(yàn)和水接觸角測(cè)試ATT的摻入對(duì)納米纖維形貌、機(jī)械性能和表面親水性能的影響；將hMSC在復(fù)合納米纖維上培養(yǎng)，使用MTT法以及掃描電鏡形態(tài)學(xué)觀察法研究復(fù)合納米纖維的細(xì)胞相容性；通過(guò)溶血和凝血試驗(yàn)評(píng)估復(fù)合納米纖維的血液相容性；最后，通過(guò)測(cè)定堿性磷酸酶（ALP）、骨鈣素和鈣離子的含量以及 von-Kossa染色法（定性評(píng)估培養(yǎng)過(guò)程中成骨細(xì)胞形成的磷酸鈣的多少）來(lái)評(píng)估PLGA/ATT復(fù)合納米纖維對(duì)hMSC成骨分化的誘導(dǎo)能力。結(jié)果表明，ATT的摻入并沒(méi)有顯著改變PLGA納米纖維均勻一致的形貌和優(yōu)良的血液相容性；ATT的摻入提高了復(fù)合納米纖維的表面親水性、機(jī)械耐受力和生物相容性。堿性磷酸酶活性檢測(cè)、骨鈣素分泌量檢測(cè)、鈣離子含量檢測(cè)和von Kossa染色表明在沒(méi)有誘導(dǎo)因子地塞米松的生長(zhǎng)培養(yǎng)基當(dāng)中PLGA納米纖維內(nèi)摻雜的ATT依然能夠誘導(dǎo)hMSCs的成骨分化。因此制備得到的有機(jī)/無(wú)機(jī)雜化PLGA/ATT復(fù)合納米纖維在組織工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域當(dāng)中具有廣泛的應(yīng)用前景。
本文第三章，我們首先用無(wú)機(jī)納米棒狀粘土ATT負(fù)載抗腫瘤藥物鹽酸阿霉素（DOX）；然后，將DOX/ATT與PLGA紡絲液混合制備DOX/ATT/PLGA靜電紡載藥納米纖維。并分別對(duì)制備得到的DOX/ATT、DOX/PLGA和DOX/ATT/PLGA納米纖維進(jìn)行了一系列表征。通過(guò)UV-vis紫外吸收法評(píng)價(jià)了DOX在中性（pH=7.4）和酸性（pH=5.4）條件下的緩釋行為；DOX/ATT/PLGA釋放藥物的抗腫瘤效果通過(guò)對(duì)CAL72細(xì)胞的刃天青還原實(shí)驗(yàn)和相差顯微鏡細(xì)胞形貌觀察評(píng)估。結(jié)果表明，DOX可以被成功的負(fù)載到ATT上；形成的DOX/ATT/PLGA復(fù)合納米纖維具有均一的形貌。最重要的是復(fù)合納米纖維表現(xiàn)出對(duì)DOX的緩慢持續(xù)釋放效果，且釋放的DOX對(duì)人骨瘤細(xì)胞（CAL72細(xì)胞）有明顯的殺傷力。相較于PLGA靜電紡載藥納米纖維，制備得到的機(jī)械耐受性大為提高且藥物緩釋能力大為增強(qiáng)的有機(jī)/無(wú)機(jī)復(fù)合納米纖維載藥體系可以應(yīng)用于封裝和持續(xù)釋放不同的藥物以獲得長(zhǎng)久的治療效果，因而在多個(gè)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有極大的應(yīng)用潛質(zhì)。
關(guān)鍵詞：
靜電紡 復(fù)合納米纖維 緩釋載體 聚乳酸-羥基乙酸 凹凸棒石
作者：
王哲
學(xué)位授予單位：
東華大學(xué)
授予學(xué)位：
碩士
學(xué)科專業(yè)：
生物化學(xué)與分子生物學(xué)
導(dǎo)師姓名：
史向陽(yáng)
學(xué)位年度：
2015
語(yǔ)種：
中文
分類號(hào)：
R318.08 TS102.65 TS104.76
在線出版日期：
2015年06月30日（萬(wàn)方平臺(tái)首次上網(wǎng)日期，不代表論文的發(fā)表時(shí)間）
本文第二章我們制備了PLGA/ATT納米纖維并研究了其作為組織工程支架誘導(dǎo)hMSC成骨分化的能力。通過(guò)不同的技術(shù)表征制備得到的PLGA/ATT納米纖維，分別使用掃描電子顯微鏡（SEM）、拉伸試驗(yàn)和水接觸角測(cè)試ATT的摻入對(duì)納米纖維形貌、機(jī)械性能和表面親水性能的影響；將hMSC在復(fù)合納米纖維上培養(yǎng)，使用MTT法以及掃描電鏡形態(tài)學(xué)觀察法研究復(fù)合納米纖維的細(xì)胞相容性；通過(guò)溶血和凝血試驗(yàn)評(píng)估復(fù)合納米纖維的血液相容性；最后，通過(guò)測(cè)定堿性磷酸酶（ALP）、骨鈣素和鈣離子的含量以及 von-Kossa染色法（定性評(píng)估培養(yǎng)過(guò)程中成骨細(xì)胞形成的磷酸鈣的多少）來(lái)評(píng)估PLGA/ATT復(fù)合納米纖維對(duì)hMSC成骨分化的誘導(dǎo)能力。結(jié)果表明，ATT的摻入并沒(méi)有顯著改變PLGA納米纖維均勻一致的形貌和優(yōu)良的血液相容性；ATT的摻入提高了復(fù)合納米纖維的表面親水性、機(jī)械耐受力和生物相容性。堿性磷酸酶活性檢測(cè)、骨鈣素分泌量檢測(cè)、鈣離子含量檢測(cè)和von Kossa染色表明在沒(méi)有誘導(dǎo)因子地塞米松的生長(zhǎng)培養(yǎng)基當(dāng)中PLGA納米纖維內(nèi)摻雜的ATT依然能夠誘導(dǎo)hMSCs的成骨分化。因此制備得到的有機(jī)/無(wú)機(jī)雜化PLGA/ATT復(fù)合納米纖維在組織工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域當(dāng)中具有廣泛的應(yīng)用前景。
本文第三章，我們首先用無(wú)機(jī)納米棒狀粘土ATT負(fù)載抗腫瘤藥物鹽酸阿霉素（DOX）；然后，將DOX/ATT與PLGA紡絲液混合制備DOX/ATT/PLGA靜電紡載藥納米纖維。并分別對(duì)制備得到的DOX/ATT、DOX/PLGA和DOX/ATT/PLGA納米纖維進(jìn)行了一系列表征。通過(guò)UV-vis紫外吸收法評(píng)價(jià)了DOX在中性（pH=7.4）和酸性（pH=5.4）條件下的緩釋行為；DOX/ATT/PLGA釋放藥物的抗腫瘤效果通過(guò)對(duì)CAL72細(xì)胞的刃天青還原實(shí)驗(yàn)和相差顯微鏡細(xì)胞形貌觀察評(píng)估。結(jié)果表明，DOX可以被成功的負(fù)載到ATT上；形成的DOX/ATT/PLGA復(fù)合納米纖維具有均一的形貌。最重要的是復(fù)合納米纖維表現(xiàn)出對(duì)DOX的緩慢持續(xù)釋放效果，且釋放的DOX對(duì)人骨瘤細(xì)胞（CAL72細(xì)胞）有明顯的殺傷力。相較于PLGA靜電紡載藥納米纖維，制備得到的機(jī)械耐受性大為提高且藥物緩釋能力大為增強(qiáng)的有機(jī)/無(wú)機(jī)復(fù)合納米纖維載藥體系可以應(yīng)用于封裝和持續(xù)釋放不同的藥物以獲得長(zhǎng)久的治療效果，因而在多個(gè)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有極大的應(yīng)用潛質(zhì)。
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靜電紡 復(fù)合納米纖維 緩釋載體 聚乳酸-羥基乙酸 凹凸棒石
作者：
王哲
學(xué)位授予單位：
東華大學(xué)
授予學(xué)位：
碩士
學(xué)科專業(yè)：
生物化學(xué)與分子生物學(xué)
導(dǎo)師姓名：
史向陽(yáng)
學(xué)位年度：
2015
語(yǔ)種：
中文
分類號(hào)：
R318.08 TS102.65 TS104.76
在線出版日期：
2015年06月30日（萬(wàn)方平臺(tái)首次上網(wǎng)日期，不代表論文的發(fā)表時(shí)間）
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